瓊脂糖電泳,將特異電泳帶用刀切下放入到 EP 管中,稱瓊脂糖帶的重量;2. 按照每100mg 加 400?l 的量加入binding buffer,放入到 EP管振蕩器中,45℃~55℃溫育振蕩,直到所有的瓊脂糖都
實驗室常用 DNA 聚合酶有三種: TaKaRa TaqTM,TaKaRa EXTaqTM 和Pyrobest TMDNA Polymerase。TaKaRa TaqTM 是一般的 DNA 聚合酶,保真性較差 ,但價錢便宜,一般用于基因表達的檢測等。TaKaRa EXTaqTM是具有 Proof reading活性的耐熱性 DNA 聚合酶,具有一定的保真性,而且其擴增得到的 PCR 產物 3’端附有一個 “A”堿基,如果希望直接將產物克隆 到 T-vector 可以用此酶。Pyrobest TM DNA
不同類型抗體儲存時注意要避免污染或損失請每次均查看抗體說明書是否有特殊的保存要求。Abcam 公司對于非正確保存的抗體不保證其有效。對于保存適當的抗體,大多數的活性保持時間為數個月甚至數年。
8% 多聚甲醛溶液配制時應60°C 加熱攪拌(溫度不要超過60°C)。溶液達到60°C 時多聚甲醛溶解,加入500ml 0.2mM 磷酸鹽緩沖液,使0.1mM 磷酸鹽緩沖液中含4% 多聚甲醛。小心滴加1 當量的氫氧化鈉溶液直至溶液澄清(每500ml 滴加1 至2 滴;如果仍未澄清,可繼續滴加?;蛘?,可在1 至2L 溶液中加入2 粒固體氫氧化鈉)。溶液變冷后過濾。
三乙醇胺-吐溫緩沖液(含0.1% 的吐溫20)
配制1L 溶液:取100ml 10 倍三乙醇胺緩沖液加890ml 超純水,再加入10ml 吐溫20 (10%)吐溫20 很粘稠會粘在量取的槍頭上,要確定加入三乙醇胺緩沖液的變性劑體積足夠。建議使用10% 的溶液進行配制,會比用未稀釋的吐溫20 溶液容易配制。
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