想同時進行多細胞因子檢測，你只需要一個“復聯”FluoroSpot

 

【Mabtech明星產品之前情回顧】：

 

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時空交織，瞬息萬變。在滅霸的平衡大法下，復仇者聯盟整支隊伍損失了超過一半的英雄；僅剩鋼鐵俠、美國隊長、雷神、黑寡婦、綠巨人、鷹眼這6位暫且存活了下來。

 

滅霸，泰坦星人，掌握宇宙強權，一個響指即可滅掉一半宇宙生命的霸主。他們，迎來了終局之戰——協助我們進行多細胞因子檢測。

 

 

 

來一波《復聯4》，勾出滿滿的回憶殺~~~

 

“超級英雄”就像我們常規的酶聯免疫斑點法（ELISpot）實驗一樣，每個實驗孔只能檢測一種細胞因子。而形成“復聯”熒光免疫斑點法（FluoroSpot），就可以實現在一個孔內同時檢測兩種或兩種以上的細胞因子或抗體。FluoroSpot是在ELISpot基礎上發展起來的新方法，擁有ELISpot的靈敏度，采用熒光法，能夠同時分析幾種分泌物。

 

FluoroSpot優勢：  

一：靈敏度高，操作簡便，相對穩定，應用范圍廣等優點。

二：能夠生成更多的數據，節省時間。與免疫斑點相比，使用的細胞和抗原均較少。

 

FluoroSpot 原理：  

三明治夾心結構在熒光斑點中得以應用，不同特異性的單克隆捕獲抗體混合物被包被于96孔板的PVDF膜上，生物素標記的檢測抗體識別一種分泌物，tag標記的檢測抗體識別其它的分泌物來實現雙色或三色細胞因子分泌細胞的檢測。通過帶有特定熒光基團的共軛試劑放大信號斑點來檢測，可用自動讀板器進行分析。

   

三色FluoroSpot分析結果圖總共可以顯示7個亞群：3個單色的細胞因子，3個雙色的細胞因子，1個三色的細胞群。圖像顯示的是一個三色FluoroSpot分析結果。用一組CEF肽刺激人的外周血單個核細胞（PBMC），分別用FITC標記IFN-γ、CY3標記IL-10和CY5標記顆粒酶B（GzB）。Overylay展示的是三個指標疊加后得到的結果。

 

三色FluoroSpot分析：能夠更容易區分不同的細胞因子

 

Mabtech的FluoroSpot試劑盒用途：  

 

1.用于分析T細胞響應，B細胞響應和分析巨噬細胞，單核細胞和樹突狀細胞，根據細胞因子不同的分布描繪不同的亞群。

2.三明治夾心法結合熒光基團標記的檢測試劑能夠對同一個孔中兩個或兩個以上的分析物進行分析。

3.對于某些分析物組合，提供帶預涂板的試劑盒。預涂板是一種方便的選擇，可以實現更快速的分析，同時將可變性降至最低。

 

艾美捷科技作為專業的生命科學領域解決方案供應商，為您推薦Mabtech品牌的FluoroSpot“戰斗裝備”，適用多種種屬，產品優質，發表多篇高分文章。以下列舉出部分的FluoroSpot試劑盒，供您參考。

 

 

PS：以上僅列出部分產品，此外Mabtech還提供10個板子的大規格包裝的FluoroSpot試劑盒。

 

FluoroSpot試劑盒的特點和優勢：

 

 

1、非常適合需要方便靈敏檢測的用戶。

2、設計用于計數分泌多種分析物的細胞。

3、適用人、猴、小鼠、牛、羊等多種種屬的試劑盒可供選擇。

4、包含不同組分的多樣化試劑盒可供客戶選擇。

5、含預包被板的試劑盒可實現更快速的分析，同時將可變性降至最低。

 

 

常見疑難問題解答：

 

哪種細胞類型適合FluoroSpot分析？

 

FluoroSpot測定基本上可以應用于任何想要研究單細胞水平的蛋白質分泌的細胞。盡管到目前為止該技術主要用于鑒定抗原活化的T細胞分泌細胞因子和B細胞分泌抗體，但可以分析非粘附細胞和粘附細胞。

 

冷凍細胞可以用于FluoroSpot嗎？

 

冷凍保存的細胞非常適合FluoroSpot。但是細胞的狀態對實驗結果有很大影響，必須規范凍存/復蘇程序以獲得高活力的細胞。

 

完成實驗操作后需多長時間讀取FluoroSpot板，即熒光基團的穩定性如何？

 

如果板保持干燥并且在黑暗中，熒光非常穩定，在分析前允許將板保存較長的時間（即幾個月）。但是，為了獲得最佳結果，我們建議在操作完成后一周內對板進行分析。

 

分析FluoroSpot板需要什么類型的分析儀？

 

FluoroSpot需要分析儀來顯示熒光斑點，因為眼睛無法觀察到斑點。我們建議使用配備濾光片的自動化系統：激發光（ex）490 nm /發射光（em）510 nm（FITC），ex 550 nm / em 570 nm（Cy3），ex 640 nm / em 660 nm（Cy5）和四色分析也包括ex 380 nm / em 430 nm（DAPI）。濾波片應對特定波長具有選擇性，以避免滲透。為了正確測量多分泌細胞，分析儀需要能夠創建疊加分析。

 

更多Mabtech的FluoroSpot試劑盒產品，歡迎垂詢艾美捷科技~

 

高分文章參考：

 

 

1.Memory B Cells Activate Brain-Homing, Autoreactive CD4+ T Cells in Multiple Sclerosis. Cell. 2018.

2.Respiratory Syncytial Virus Infects Regulatory B Cells in Human Neonates via Chemokine Receptor CX3CR1 and Promotes Lung Disease Severity.Immunity.2017.

3.Microbiota epitope similarity either dampens or enhances the immunogenicity of disease-associated antigenic epitopes.PLoS One. 2018.

4.Comparison of ELISpot and FluoroSpot in the Analysis of Swine Flu-Specific IgG and IgA Secretion by in Vivo Activated Human B Cells. Cells. 2012.

5.Immunogenicity of synthetic peptide constructs based on PvMSP9E795-A808, a linear B-cell epitope of the P. vivax Merozoite Surface Protein-9. Vaccine. 2019.

 

Mabtech公司于1986年創辦于瑞典，是一家歐洲的集研究，開發，銷售，技術支持為一體的高科技免疫生物技術公司。Mabtech公司始終專業致力于研發新的單克隆抗體，生產創新的免疫試劑和銷售高品質的全配套的免疫試劑盒。公司核心業務是致力于優化發展酶聯免疫斑點法技術 (ELISpot)、熒光免疫斑點法技術 (FluoroSpot) 和酶聯免疫吸附試驗技術 (ELISA) 等免疫學方法。公司開發和生產多種針對細胞因子，免疫球蛋白和載脂蛋白的單克隆抗體，用于生命科學研究中的體外應用。Mabtech的試劑盒可用于研究感染性疾病，癌癥，過敏，移植等免疫反應，通常用作疫苗試驗中的監測工具。此外，還生產用于獸醫和心血管研究的試劑盒。

 

艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等，可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業資訊、完備的產品及物流服務。

 

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