重組子可通過酶切進行鑒定，也可以利用擴增引物通過 PCR 進行鑒定，陽性重組子能切出所需要的片段或得到相應片段的 PCR 產物

取 100ul感受態細胞于冰浴上融化

挑取適當菌株的 E.coli 單菌落接種于 2ml SOB 培養液中，37℃搖床過夜

連接前先電泳確定待連接載體與片段的濃度

酶切前確定待切樣品的濃度, 并選擇合適的限制性內切酶和配套 Buffer

加入 1/10 體積的乙酸鈉（3 mol?L，PH=5.2）于 DNA 溶液中充分混勻，使其最終濃度為 0.3 mol?L

此方法適用于小量質粒DNA 的提取提取的質粒 DNA 可直接用于酶切PCR擴增 。

瓊脂糖電泳，將特異電泳帶用刀切下放入到 EP 管中，稱瓊脂糖帶的重量；2. 按照每100mg 加 400?l 的量加入binding buffer，放入到 EP管振蕩器中，45℃～55℃溫育振蕩，直到所有的瓊脂糖都

1.用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈，放在制膠平板上，封閉模具邊緣，架
好梳子；

PCR 反應管中調制反應液

實驗室常用 DNA 聚合酶有三種： TaKaRa TaqTM，TaKaRa EXTaqTM 和Pyrobest TMDNA Polymerase。TaKaRa TaqTM 是一般的 DNA 聚合酶，保真性較差 ，但價錢便宜，一般用于基因表達的檢測等。TaKaRa EXTaqTM是具有 Proof reading活性的耐熱性 DNA 聚合酶，具有一定的保真性，而且其擴增得到的 PCR 產物 3’端附有一個 “A”堿基，如果希望直接將產物克隆 到 T-vector 可以用此酶。Pyrobest TM DNA

介紹組蛋白印跡的操作詳細流程。