我們今天要介紹的是miRNA絕對定量的新方法-miRNA酶聯免疫分析（miREIA）。大量研究表明，miRNA是人類病理學中有潛力的診斷和預后生物標志物。
miREIA檢測原理：將生物素標記的特異性DNA寡核苷酸與樣本中分離出的miRNA雜交。 然后將DNA / RNA雜交體轉移到固相上，固相涂有對完美匹配的RNA / DNA-生物素雜交體的特異單克隆抗體。然后將洗滌后的固相與鏈霉親和素-HRP偶聯物一起孵育，并通過發色底物?3,3'，5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）進行顯色觀察，吸光度與血液樣本中存在的特定miRNA種類的濃度成比。
同時我們也測試了miREIA在各種生物樣品中的性能。我們使用miREIA試劑盒對從全血，HeLa細胞，外周血單核細胞，結直腸癌組織，關節滑液，唾液和尿液樣本中分離的miRNA進行定量，結果表明，我們的miREIA試劑盒可以很好的對上述所有樣本中的miRNA進行定量，檢測結果如下：
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| 全血樣本中miRNA的分離及定量：將全血收集到PAXgene血液RNA收集管中。 使用RNA分離試劑盒（RIK001）分離RNA，該試劑盒旨在從培養的細胞，人/動物組織，植物組織和全血中分離RNA。 通過miREIA試劑盒測量了十二種不同miRNA的絕對濃度。 |
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| Hela細胞樣本中miRNA的分離及定量： 使用 RNA分離試劑盒（RIK001）從HeLa細胞中分離RNA。8種不同miRNA的絕對濃度由miREIA試劑盒測定. |
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| PBMC細胞樣本中的miRNA定量：采用His-topaque密度梯度離心法從全血中分離外周血單核細胞(PBMC)。使用RNA分離試劑盒（RIK001）分離RNA。7種不同mirna的絕對濃度由miREIA試劑盒測定. |
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| 直腸癌組織樣本中miRNA提取及定量：切除獲得的結直腸癌(CRC)組織被穩定并儲存在RNAlater溶液中。使用RNA分離試劑盒（RIK001）分離RNA。8種不同mirna的絕對濃度由miREIA試劑盒測定. |
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| 關節滑液樣本中miRNA的分離及定量: 使用血漿/血清RNA分離試劑盒（RIK002）從滑液中分離RNA。 通過miREIA試劑盒測量了五個不同miRNA的絕對濃度. |
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| 唾液樣本中miRNA的分離及定量: 使用血漿/血清RNA分離試劑盒（RIK002）從唾液中分離RNA。 通過BioVendor miREIA試劑盒測量了兩種不同的miRNA的絕對濃度. |
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| 尿液樣本中miRNA的分離及定量: 使用血漿/血清 RNA分離試劑盒（RIK002）從尿液中分離RNA。通過miREIA試劑盒測量了兩種不同miRNA的絕對濃度。 |
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